1.按MTT檢測法培養(yǎng)細胞和用不同稀釋度的 細胞因子 處理細胞。
2.吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌兩次(如為懸浮細胞,應在吸去上清液前先離心)。
3.每孔加60μl NAG染液,在37℃ 5% CO 2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時。
4.每孔加90μl終止液,混勻后置酶聯(lián)檢測儀上測定光密度(OD)值,檢測波長402nm。以OD值對樣品稀釋度作圖,比較標準曲線和待測樣品曲線即可求得待測樣品中 細胞因子 的含量。
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